人骨髓基质干细胞体外诱导和鉴定

• 作者: 崔磊 柴岗 石润杰
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓组代细胞 细胞培养 成骨细胞 软骨细胞 脂细胞
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 144-146
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2626字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立人自体骨髓基质干细胞(human menchymal stem cells,hMSCs)体外分离、鉴定体系,建立经诱导表达成骨、软骨、脂肪细胞表型的体外培养体系,探讨作为骨组织工程种子细胞的可能性,为组织工程技术应用打下基础.方法 抽取患者骨髓5 ml,以密度梯度法分离hMSCs,使用流式细胞仪鉴定细胞表型;应用免疫组化和分子生物学技术,对hMSCs进行成骨、软骨、脂肪细胞的诱导培养和表型鉴定.结果 第2代hMSCs阳性细胞表达率CD105(78±6)%,CD166(43±7)%,CD29(69±12)%:hMSCs成骨诱导培养第3代平均扩增(163.4±13.4)倍,形成钙结节,骨细胞转录因子、骨钙素、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原免疫荧光阳性,RT-PCR证实有Ⅰ型胶原、骨钙素、骨桥蛋白和骨结合素mRNA表达,对照组阴性;成软骨细胞诱导培养后Ⅱ型胶原、SOX9(SRY-type HMG box 9,是在哺乳动物性别决定和软骨生成中起着关键调控作用的一个基因).免疫荧光阳性,RT-PCR证实Ⅱ型胶原、软骨聚集蛋白聚糖mRNA表达,对照组阴性;成脂肪细胞诱导培养后,油红-O染色阳性,RT-PCR证实PPAR 2mRNA表达,对照组阴性.结论 通过密度梯度法可获得较高纯度hMSCs,经体外培养能保持多项分化潜能,体外诱导培养第3代仍可表达各种细胞表型,能够满足骨组织工程临床应用对种子细胞质和量的需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔磊		25	123	7.0	9.0
2	柴岗	上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科	20	94	5.0	9.0