异种化PSCA融合基因抗前列腺癌DNA疫苗的构建及真核表达

• 作者: 于继云 张亮 王晓雄 田仁礼 董金凯 贾锐 阎瑾琦 韩刚 高江平
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 前列腺干细胞抗原 疫苗,DNA
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 88-90
• 页数: 3页
• 分类号: R737.25
• 字数: 2327字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含有人前列腺干细胞抗原(PSCA)主要T细胞表位的DNA疫苗(pVAX1-PSCA3-Fc-GPI-IRES-GM/B7,简称pVAX1-PSCA3FcGB),并在Cos7细胞中表达.方法:重叠延伸PCR合成异种化PSCA基因片段,同尾酶法将该片段3拷贝串联(PSCA3)后插入pCI-Fc-GPI载体中,再将PSCA3-Fc-GPI融合基因片段经酶切后导入真核表达载体pVAX1-IRES-GM/B7中,构建pVAX1-PSCA3FcGB疫苗,并检测其真核表达情况.结果:经测序异种种化PSCA片段与设计一致,PCR和酶切鉴定证明pVAX1-PSCA3FcGB构建成功;间接免疫荧光和流式细胞仪检测结果显示,该疫苗在Cos7细胞中获得较好表达.结论:成功构建DNA疫苗pVAX1-PSCA3FcGB,并在Cos7细胞中有效表达,为下一步的DNA疫苗功能研究奠定了重要基础.