小发夹RNA抑制人上皮生长因子受体-2基因表达细胞株的构建

• 作者: 傅娟 居颖 沈月兰 蒋义国 陈学敏
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 7,8-二氢-7,8-二羟苯并(a)芘9,10-氧化物 细胞系,转化 基因,erbB-2 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 714-717
• 页数: 4页
• 分类号: R9
• 字数: 2905字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2009.08.016

摘要

目的 在经反式二羟环氧苯并芘(BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞基础上建立一种载体介导的小发夹RNA(shRNA)抑制人上皮生长因子受体-2(HER2/neu)表达的稳定细胞株.方法 构建靶向干扰HER2/neu shRNA逆转录病毒载体pSIREN-RetroQ-neu,经酶切及测序鉴定后,将重组表达载体经脂质体介导入反式BPDE恶性转化细胞中,同时以阴性片段重组载体转染细胞(阴性对照)和空白细胞(16HBE-T)做对照,经嘌呤霉素筛选阳性转染细胞株.半定量RT-PCR和Westernblotting技术分别检测分析各组细胞中HER2/neu基因mRNA和蛋白表达差异.结果 获得载体介导靶向抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu基因表达的细胞株.pSIREN-RelroQ-neu阳性转染细胞组分别比较阴性对照和空白细胞组HER2/neu mRNA表达量均下降(平均灰度值分别为0.114±0.003、0.186±0.001、0.182±0.015),其差异有统计学意义(t值分别为39.154、7.564,P值均<0.05),而阴性与空白对照组间相比差异无统计学意义(t=-0.409,P>0.05).pSIREN-RetroQ-neu转染细胞组相比阴性对照和空白细胞组HER2/neu蛋白表达明显下降,其抑制率分别达40%和39%.结论 成功构建pSIREN-RetroQ-neu重组质粒,并能有效抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋义国	广州医学院化学致癌研究所与预防医学系	46	374	10.0	18.0
2	陈学敏	华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生系国家教育部环境与健康重点实验室	59	634	15.0	21.0
3	沈月兰	广州医学院化学致癌研究所与预防医学系	7	60	3.0	7.0
4	傅娟	华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生系国家教育部环境与健康重点实验室	13	55	5.0	6.0
5	居颖	华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生系国家教育部环境与健康重点实验室	2	1	1.0	1.0