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摘要:
目的:构建MMP-7基因真核重组质粒,检测并鉴定MMP-7在人宫颈癌HeLa细胞中的表达.方法:提取宫颈癌组织总RNA,通过基因克隆构建MMP-7基因真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)/MMP-7,酶切、PCR及基因测序鉴定,用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染人宫颈癌Hela细胞,RT-PCR检测外源基因的表达、间接免疫荧光法检测对表达产物进行鉴定.结果:成功构建了重组表达质粒pcDNA3.1(+)/MMP-7并转染了人宫颈癌Hela细胞,通过RT-PCR可以检测到MMP-7 mRNA在Hela细胞中的表达,经间接免疫荧光反应可检测到明显的阳性反应,而转染空载体组表达阴性.结论:构建的重组质粒peDNA3.1(+)/MMP-7能在Hela细胞中表达,为该蛋白在人子宫癌后续的功能研究奠定了基础.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 MMP-7基因真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达与鉴定
来源期刊 现代生物医学进展 学科 医学
关键词 MMP-7 重组质粒 Hela细胞 基因表达
年,卷(期) 2009,(13) 所属期刊栏目 临床研究
研究方向 页码范围 2535-2537
页数 分类号 R-332|R322.61
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 万炜 南华大学人体解剖学教研室 43 177 7.0 11.0
2 张江霖 8 58 3.0 7.0
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MMP-7
重组质粒
Hela细胞
基因表达
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现代生物医学进展
旬刊
1673-6273
23-1544/R
16开
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
14-12
2001
chi
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22114
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