耐热DNA聚合酶基因双元载体的初步构建

• 作者: 关彩蝶 廖伯强 柳勇 梁雪莲
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: PCR Taq DNA聚合酶 双元载体 蓝白筛选
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 189-193
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 3407字
• 语种: 中文

摘要

Taq DNA聚合酶是PCR反应中的重要试剂,它具有结构性稳定和耐高温的特性,有能在90℃以上合成DNA的能力,因此被广泛使用于DNA扩增技术当中,但是国内尚未报道有关Taq DNA聚合酶基因用于转基因的研究.若将此耐热基因转入某些经济作物中培育耐热新品种,将会有很好的前景和实用价值.本试验将初步构建Taq DNA聚合酶的基因表达双元载体.通过引物设计,用PCR法从含有Thermus aquaticus DNA polymerase克隆基因的散装Taq DNA 聚合酶中扩增耐热DNA 聚合酶基因,得到约2.5 kb的DNA片段.扩增片段连接到质粒pUC19中测序证实是Taq DNA聚合酶基因,再将该片段重组到双元载体pBin19中,通过蓝白筛选选择重组子,构建耐热DNA聚合酶的基因双元载体pBin19-Taq.对其作进一步的加工,即插入植物启动子和增强子等后,可通过土壤农癌杆菌的介导作用,用作植物转基因之用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁雪莲	仲恺农业工程学院生命科学院	34	208	7.0	13.0
2	关彩蝶	仲恺农业工程学院生命科学院	1	1	1.0	1.0
3	柳勇	仲恺农业工程学院生命科学院	1	1	1.0	1.0
4	廖伯强	仲恺农业工程学院生命科学院	1	1	1.0	1.0