阔叶猕猴桃果实GalDH cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 尚增振 梁东 王小华 马锋旺
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 阔叶猕猴桃 GalDH 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 1741-1748
• 页数: 8页
• 分类号: S663.4|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0513-353X.2009.12.004

摘要

以猕猴桃属植物中果实维生素C含量最高的阔叶猕猴桃(Actinidia latifolia Merr.)果实为试材,经RT-PCR扩增获得约1.0 kb的L-半乳糖脱氢酶cDNA片段.生物信息学分析表明,该cDNA片段长为997 bp,最大开放阅读框为960 bp,可编码319个氨基酸残基,命名为AlGalDH,GenBank登录号为EU525846,核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其它植物GalDH核苷酸、氨基酸序列间的同源性分别在76%和70%以上,且具有醛酮还原酶的保守结构域.构建了其原核表达载体pET-AlGalDH并转化大肠杆菌BL21,经0.1 mmol·L~(-1) IPTG诱导,获得具有较高活性的表达融合蛋白6×His-AlGalDH.经Ni-His亲和磁珠分离纯化,获得单一的融合目的蛋白条带,测定其酶活为120 pmol·min~(-1)·mg~(-1).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁东	西北农林科技大学园艺学院	40	526	13.0	21.0
2	马锋旺	西北农林科技大学园艺学院	150	2555	28.0	42.0
3	尚增振	西北农林科技大学园艺学院	3	8	2.0	2.0
4	王小华	西北农林科技大学园艺学院	2	4	1.0	2.0