西瓜第一染色体显微分离及其特异文库的构建

• 作者: 吕柳新 张志忠
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 西瓜 染色体微分离和微克隆 单染色体文库
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用、组织培养及植物细胞学
• 页码范围: 1803-1807
• 页数: 5页
• 分类号: S651
• 字数: 3341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2009.12.017

摘要

采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离到西瓜(2n=22)的第一单染色体,将分离到的西瓜染色体放入0.2 mL Eppendorf管中,经去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头后,进行两轮PCR扩增,得到0.4～2.0 kb之间的DNA片段.用西瓜的基因组标记成探针,与单染色体扩增产物进行southem杂交,表明这些西瓜单染色体扩增片段与西瓜基因组DNA之间有同源性,从而证明单染色体DNA确实已被成功地扩增.将第2轮PCR产物构建质粒文库,得到约20 000个重组子.这是染色体微分离、微克隆技术首次在瓜类作物中的应用,该方法为直接从西瓜单条染色体DNA文库中筛选分子标记奠定了基础,说明利用染色体显微分离、克隆技术对西瓜等瓜类作物基因组进行研究是可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志忠	福建农林大学园艺学院	49	787	17.0	27.0
2	吕柳新	福建农林大学园艺学院	89	1859	25.0	36.0