斑马鱼干扰素γ的克隆表达研究

• 作者: 付淑霞 孙德明 张长勇 王天奇 祝梅香 穆苑 高昌 齐晓伟
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 斑马鱼 干扰素γ 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2421-2423
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:通过人工诱导斑马鱼干扰素的产生,证实两种斑马鱼干扰素γ基因ifng1-1和ifng1-2的存在,并克隆这两种干扰素基因,构建高效表达载体并做原核表达.方法:通过conA药浴,诱导斑马鱼干扰素γ的表达,即刻提取组织总RNA,并通过RT-PCR方法扩增两种干扰素γ基因.将目的基因连入表达载体pET24a,构建重组载体pET24a-ifng1-1和pET24a-ifug1-2.将载体转化BL21,并用IPTG诱导融合蛋白的表达.产物经SDS-PAGE检测,分析蛋白表达情况.结果:成功克隆了两种斑马鱼干扰素γ基因,构建了pET24a-ifng1-1和pET24a-ifng1-2重组载体,并实现了原核融合表达.结论:两种干扰素γ基因都能够被conA所诱生,且具有相似特性,表明两种干扰素γ都不是假基因,都有可能在免疫系统中发挥作用,本实验为进一步研究两种干扰素γ的功能奠定了基础.