细胞密度对髓核细胞产生蛋白聚糖影响的体外实验

• 作者: 李放 田海泉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞密度 蛋白聚糖 组织工程,髓核细胞
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 313-316
• 页数: 4页
• 分类号: R681
• 字数: 4255字
• 语种: 中文

摘要

背景:退变的椎间盘组织一个重要改变是聚集蛋白聚糖明显减少,如何能够刺激髓核细胞产生更多的蛋白聚糖是学者们一直探索的问题.目的:将椎间盘髓核细胞以不同的密度植入凝胶材料中,评价细胞密度对蛋白聚糖含量的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-08/2008-02在解放军北京军区总医院骨科实验室完成.材料:清洁级3月龄日本大耳兔3只.Live/Dead Assay kit,sGAG Assay kit试剂盒由北京纵横洋洲医药生物科技有限公司提供.方法;无菌条件下取兔椎间盘,常规分离消化其髓核细胞,传第2代时以1.0×109L-1密度接种在自制的壳聚糖支架中,细胞密度扩增至4×109L-1和25×109L-1时进行检测.主要观察指标:阿利辛蓝法测蛋白聚糖含量.氪氩激光器共聚焦显微镜下观察培养细胞存活情况.结果:培养14 d,细胞密度为4×109L-1时,聚集的蛋白聚糖总量为(551.65±70.10)mg/L,当细胞密度增加到25×109L-1时,聚集蛋白聚糖总量为(2245.28±462.52)mg/L.但蛋白聚糖增加的量和细胞密度并不成比例,细胞密度增加了6倍,蛋白聚糖含量只增加了两三倍.低密度培养7 d时,结果显示100%的细胞存活.高密度培养7 d时,30%的细胞在材料中央死亡,边缘部位的细胞几乎全部存活.结论:体外三维培养髓核细胞产生的蛋白聚糖随种植细胞密度增加而缓慢增加,高细胞密度对蛋白聚糖聚集有限制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李放	解放军北京军区总医院全军骨科中心	15	58	6.0	7.0
2	田海泉	解放军北京军区总医院全军骨科中心	3	8	2.0	2.0