携带PTEN基因的重组腺病毒表达载体构建的研究

• 作者: 曾照芳 韦永琼
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: PTEN基因 重组腺病毒 栽体 构建
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 83-86
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3214字
• 语种: 中文

摘要

构建携带抑癌基因PTEN(Phosphatase and temin homolog deleted on chromosome ten)的重组腺病毒表达裁体,为研究PTEN的功能和作用机制奠定基础.采用RT-PCR法从大鼠海马神经元扩增目的基因PTEN,克隆人含绿色荧光蛋白(Green fluorescence protein),GFP基因的pAdTrack-CMV穿梭质粒,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌内进行同源重组;获得重组腺病毒质粒,经Pacl线性化后,转染AD293细胞.结果表明,感染腺病毒载体的AD293细胞表达GFP基因,随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),经PCR对传代的Ad-PTEN分析证实得到目的基因.成功构建了携带PTEN基因的腺病毒表达载体,为研究PTEN的功能和作用机制奠定了基础.