phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析

• 作者: 吴忠义 张秀海 王永勤 王玉华 贾敬芬 黄丛林
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 烟草 叶绿体转化 phaG和phaC 遗传分析
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 1949-1957
• 页数: 9页
• 分类号: S3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2009.01949

摘要

中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain.length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯.羟酰-CoA-ACP-转移酶和Ⅱ型PHA合酶是mcl-PHAs生物合成途径中的两个关键酶.将编码羟酰-CoA-ACP-转移酶的基因phaG与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子连接构建表达盒RpsbA-pro-phaG-RpsbA-ter,将Ⅱ型PHA合酶的基因phaC与水稻叶绿体16S rRNA基因的强启动子Prm及rbcL基因的终止子连接构建表达盒prrn-phaC-RrbcL-ter,连同壮观霉素抗性基因aadA表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter-起克隆进烟草叶绿体基因组同源片段rbcL和accD之间,得到烟草叶绿体表达载体pTGC.用包裹有质粒pTGC的金粉子弹轰击烟草无菌苗叶片,经壮观霉素筛选后获得6株叶绿体型转基因植株.对T_0代和T_1代转基因植株进行PCR检测和Southern blot分析表明,外源基因已整合进烟草叶绿体基因组中,且T_1代转基因植株已同质化.RT-PCR分析结果证实外源基因已在转录水平上表达.转基因植株的自交及正反交结果表明,外源基因在转基因后代中能够稳定遗传,遗传方式遵循母性遗传规律,不存在转基因的花粉漂移现象.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永勤	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	34	337	10.0	16.0
2	张秀海	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	48	499	12.0	20.0
3	吴忠义	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	50	483	12.0	19.0
4	黄丛林	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	57	710	15.0	24.0