骨形态发生蛋白在大肠杆菌中表达的研究

• 作者: 黄军荣
• 来源期刊: 安徽医药
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白 基因 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 临床医学
• 页码范围: 38-40
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-6469.2009.01.020

摘要

目的 骨形态发生蛋白(bone morpbogenetic protein,BMP)是一种具有诱导活性的酸性糖蛋白,在组织工程研究和临床应用上需求量较大,BMP-2在组织中含量较微,利用基因工程方法生产重组BMP-2显得尤为重要.方法 本研究根据人骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)基因序列设计出引物,以克隆载体质粒pBR322-BMP-2为模板,得到BMP-2基因并重组入原核表达载体pGEX-4T-1中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定并用Western bloting检测.结果 SDS-PAGE显示,得到40 KD的目的 蛋白,表达量可达菌体总蛋白的15.2%,Western bloting检测表明,抗BMP-2单抗可与相对分子量40 KD大小的电泳条带发生特异性反应,从而证明表达产物具有目的 蛋白构型.结论 本研究为进一步研究利用原核表达系统大量生产BMP-2打下基础.