猪骨髓间充质干细胞超顺磁性氧化铁标记方法的实验研究

• 作者: 姚志峰 孙爱军 巩雪 张书宁 张少衡 曾蒙苏 杨姗 葛均波 解新星 邹云增 金航 黄榕翀 黄浙勇
• 来源期刊: 中国临床医学
• 学科: 医学
• 关键词: 超顺磁性氧化铁 间充质干细胞 标记
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 临床基础研究
• 页码范围: 657-661
• 页数: 5页
• 分类号: R318.12
• 字数: 5271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6358.2009.05.002

摘要

目的:探索超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记猪骨髓间充质干细胞(MSCs)的合适方案.方法:分离培养猪MSCs,用不同SPIO浓度、不同共孵育时间进行标记,根据标记效率指标(普鲁士蓝染色、细胞铁浓度测定、细胞透射电镜检查)和标记毒性指标(台盼蓝排除试验、CCK-8试验)确定适宜的标记条件,然后对不同标记细胞进行磁共振(MR)体外成像.结果:(1)随着SPIO浓度的增加,MSCs细胞内平均含铁量相应升高;细胞涂片普鲁士蓝染色也显示细胞内蓝染颗粒相应增加.当SPIO浓度为25、50 μg·mL-1时,细胞存活率和细胞活力与无SPIO时差异无统计学意义(P>0.05);但当SPIO浓度增加到100 μg·mL-1时,CCK-8试验显示细胞活力下降(P<0.01);当SPIO浓度增加到200 μg·mL-1时,细胞存活率和细胞活力均下降(P<0.05);(2)设定SPIO浓度为50 μg·mL-1,随共孵育时间增加,细胞内含铁量逐渐升高(各组间比较均P<0.01);当标记时间为0、2、4、8、16、24 h 时,细胞存活率和细胞活力并差异无统计学意义(P>0.05);但当标记时间进一步延长到48 h时,细胞存活率有所降低(P<0.05);(3)按"50 μg/ml×24 h 方案"标记后,1.5 T MR成像仪体外MR T2·WI flash检测阈值为7.5×104个细胞.结论:50 μg·mL-1×24 h 方案是猪骨髓间充质干细胞比较合适的磁探针标记方案.