嗜酸氧化亚铁硫杆菌APS还原酶的表达、纯化及其性质鉴定

• 作者: 吴安娜 张晓键 张燕飞 戴云杰 柳建设 郑春丽
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜酸氧化亚铁硫杆菌 APS还原酶 cysH 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 812-814,841
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.99
• 语种: 中文

摘要

嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)中APS还原酶是硫同化途径的一个关键酶,其对硫酸盐的还原及硫化物的氧化具有重要调节作用.本文以A.ferrooxidans ATCC23270基因组为模板.通过PCR扩增得到编码APS还原酶的cysH基因,与原核表达载体pLM l构建重组体,转化入大肠杆茵(Escherichia coli,E.coli)DH5a中,测序正确后,加IPTG诱导表达,用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的APS还原酶.由蛋白颜色和紫外分析,确定其含有一个[Fe4S4]簇作为活性中心.表达产物进行SDS-PAGE分析,证实分子量为28 kD.酶活测定表明其具有将APS还原为亚硫酸盐跟AMP的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张燕飞	中南大学资源加工与生物工程学院	7	63	4.0	7.0
2	郑春丽	中南大学资源加工与生物工程学院	35	102	6.0	8.0
6	吴安娜	中南大学资源加工与生物工程学院	2	9	2.0	2.0
7	戴云杰	中南大学资源加工与生物工程学院	2	9	2.0	2.0
8	张晓键	中南大学资源加工与生物工程学院	1	6	1.0	1.0