基于核酸适配体-质粒DNA复合物信号放大的荧光免疫传感技术

• 作者: 俞汝勤 朱静 沈国励 蒋健晖 蒋小平 谭钟扬 黄勇
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 核酸适配体 血小板衍生增长因子 核酸适配体-质粒脱氧核糖核酸复合物 免疫传感
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1596-1600
• 页数: 5页
• 分类号: O6
• 字数: 3617字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2009.11.007

摘要

提出了一种简便、高灵敏的荧光免疫传感新技术,通过抗体/抗原/核酸适配体-质粒DNA复合物的特异性识别与双链质粒DNA与荧光染料SYBR Green Ⅰ的嵌合作用,实现对血小板衍生增长因子BB(PDGF-BB)的检测.生物识别反应在微孔板中进行,PDGF-BB抗原与微孔板底部预包被的PDGF-BB抗体免疫反应后,加入核酸适配体-质粒DNA复合物与抗原形成夹心复合物.加入DNA双链嵌合染料SYBR Green Ⅰ与夹心复合物的双链DNA部分结合可产生强荧光,其荧光强度可用于定量测定PDGF-BB浓度.实验考察了离子浓度、核酸适配体的延伸引物片段与质粒PUC19的反应比例、染料SYBR Green Ⅰ浓度等分析条件对荧光信号的影响.在优化反应条件下,PDGF-BB检测的线性范围为0.2～200 μg/L,检出限为0.1 μg/L,并且实现了对人血清中PDGF-BB的定量检测.