小鼠脾脏树突状细胞的体外扩增与培养

• 作者: 成建平 王杰 韩超 黄军华
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脾脏 树突状细胞 扩增
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 873-876
• 页数: 4页
• 分类号: R617
• 字数: 3974字
• 语种: 中文

摘要

背景:脾脏来源的树突状细胞诱导周期长,产量相对较少,相关报道亦较少.目的:建立简便的体外扩增小鼠脾脏树突状细胞的方法.设计、时间及地点:细胞形态学观察实验,于2007-02/09在华北石油总医院中心实验室完成.材料:健康BALB/C小鼠、C57小鼠及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素4.方法:无菌手术取C57小鼠脾脏,用1 mL注射器抽取Hanks液,刺入脾脏并反复冲洗,获取单个核细胞,用0.1 g/L粒-单核细胞集落刺激因了、白细胞介素4的H-DMEM培养,8 d后即得成熟的树突状细胞.同时无菌取BABIJC小鼠脾脏制备单细胞悬液,收集非黏附细胞调整密度后作为反应细胞.再将两种细胞混合培养.主要观察指标:成熟树突状细胞的形态学观察,并对其表面CD11c,CD86及MHC-Ⅱ类分子进行检测.并计算两种细胞混合培养后的吸光度值.结果:体外诱导培养8 d后获得大量成熟的树突状细胞,细胞表面具有典型的树枝状突起,高表达树突状细胞相对特异性表面分子CD11c(78.46%)、CD86(87.24%)及MHC-Ⅱ(92.65%),同时具有较强的刺激同种异基因混合淋巴细胞增殖的能力.结论:联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素体外诱导培养小鼠脾脏细胞,可生成大量功能成熟的树突状细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄军华		11	27	3.0	5.0
2	王杰		3	10	3.0	3.0
3	成建平		1	3	1.0	1.0
4	韩超		1	3	1.0	1.0