糖基化磷脂酰肌醇锚定型EGFP真核表达质粒的构建及表达

• 作者: 朱大冕 郭荫广 陈全
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: GPI 真核表达载体 A549 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 89-91,97
• 页数: 4页
• 分类号: Q1
• 字数: 2698字
• 语种: 中文

摘要

构建与增强型绿色荧光蛋白基因相连的糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidylinositol,GPI)序列的真核表达质粒,并检测其在A549细胞中的表达.分离人外周血淋巴细胞,提取总RNA,以RT-PCR法扩增CD24基因的243 bp GPI锚定序列,双酶切后定向克隆入pEGFP-C1质粒中,构建并鉴定pEGFP-C1-GPI质粒.经脂质体介导转染A549细胞后,在荧光显微镜下观察目的蛋白在真核细胞内的表达情况.经酶切和测序鉴定证实,所克隆的CD24 GPI序列正确,荧光显微镜观察pEGFP-C1-GPI质粒转染A549细胞可见围绕细胞膜的强绿色荧光,而对照pEGFP-C1质粒转染A549细胞仅见胞内均匀荧光.成功构建与EGFP相连的GPI真核表达质粒,且能在A549细胞膜上锚定表达EGFP-GPI融合蛋白,为构建锚定表达型肿瘤疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈全	重庆医科大学基础医学院免疫学教研室	58	230	9.0	11.0
2	朱大冕	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	6	17	2.0	4.0
3	郭荫广	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	2	3	1.0	1.0