60Co-γ对Cl.beijerinckii原生质体的辐照诱变

• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 丁醇 Cl.beijerinckii 原生质体 60Co-γ射线 诱变
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 2549-2554
• 页数: 6页
• 分类号: Q815
• 语种: 中文

摘要

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株,将其原生质体化后进行60Co-γ辐照诱变,筛选出了一株稳定高产的变异株.原生质体的最优制备条件为:将培养至15 h的细胞添加1 g·L-1甘氨酸和0.3 U·L-1青霉素培养2 h后,37℃下,2×104 U·L-1溶菌酶作用8 h脱壁.经平板计数,原生质体形成率可达99.82%,原生质体再生率达10.12%.采用60Co-γ射线进行辐照诱变,当辐照剂量率5 Gy·min-1,辐照剂量为500 Gy时,原生质体致死率可达99.3%.经反复筛选,获得一株丁醇高产菌株R3,该菌具有较高的遗传稳定性.在P2半合成液体培养基中,37℃下静置培养72 h,总溶剂产量较出发菌株提高81.46%,丁醇产量提高85.41%.