TD-PCR技术用于肠道病毒71的检测

• 作者: 俞守义 郭江 陈志永 陈清 高璐璐
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 降落聚合酶链反应 肠道病毒71型 检测
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 1377-1379,1384
• 页数: 4页
• 分类号: R446.6
• 语种: 中文

摘要

目的 评价降落聚合酶链反应(touchdown PCR,TD-PCR)检测肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)的效能和敏感性.方法 根据touchdown原理设计TD-PCR程序,试验选择PCR最佳反应条件,分别与普通PCR及TD-PCR、普通Taq酶与热启动酶扩增效果进行比较,并利用10倍稀释法检验了TD-PCR方法的灵敏度.琼脂糖凝胶电泳验证扩增产物,纯化后DNA产物测序验证该方法的特异性.结果 TD-PCR的扩增片段条带清晰,检测效果明显优于普通PCR,使用普通Taq酶的TD-PCR比使用热启动酶有更优的性价比,测序证实了此组片段的特异性,cDNA的最低检测浓度为1.03.μg/mL.结论 成功建立TD-PCR检测EV71的方法,使用普通Taq酶获得理想的检测结果,为快速检测手足口病的病原体提供了可靠的手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈清	南方医科大学流行病学系	238	2007	21.0	32.0
2	俞守义	南方医科大学流行病学系	142	1125	17.0	26.0
3	郭江	南方医科大学流行病学系	8	42	4.0	6.0
4	陈志永	南方医科大学流行病学系	5	10	2.0	3.0