小鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养和鉴定

• 作者: 汪茜 王明新 蒲传强
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卫星细胞,骨骼肌 细胞分离 细胞培养技术
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 203-205
• 页数: 3页
• 分类号: R394.26
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2009.02.023

摘要

目的 探讨小鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养方法及鉴定技术. 方法 取新生小鼠后肢肌,采用混合酶消化法获得细胞悬液,经Percoll分离,结合差速贴壁法提纯骨骼肌卫星细胞.倒置显微镜观察细胞形态及增殖状况,绘制细胞生长曲线,采用结蛋白、α-肌动蛋白免疫细胞化学方法鉴定骨骼肌卫星细胞. 结果 原代骨骼肌卫星细胞呈圆形,培养1d后逐渐贴壁生长,细胞分布均匀,多呈圆形,48h后开始增殖,此后细胞体积逐渐增大并开始分裂,镜下可见2～3个或多个细胞成串排列,3～4d后细胞进入对数生长期,此时圆形细胞占优势,可见多处局部细胞克隆呈簇样生长.培养7～10d细胞生长至单层且成片分布(50%～70%),梭形或纺锤形细胞增多,但仍有部分细胞呈圆形,12～14d后细胞增殖减缓.免疫细胞化学染色显示,分离得到的小鼠骨骼肌卫星细胞表达肌源性标志物结蛋白联合骨骼肌特异性蛋白α-肌动蛋白. 结论 采用混合酶消化、Pereoll分离结合差速贴壁法可培养出高纯度的骨骼肌卫星细胞,结蛋白和骨骼肌肌动蛋白免疫细胞化学染色可更有效地鉴定骨骼肌卫星细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒲传强	解放军总医院神经内科	153	831	15.0	22.0
2	王明新	武警总医院骨科	18	126	6.0	10.0
3	汪茜	解放军总医院神经内科	12	35	3.0	5.0