应用心肌自发荧光评估存活心肌线粒体氧化代谢状态

• 作者: Aneba S. Chorvat Jr.D. Chorvatova A. 任明明 刘云奇 程颖
• 来源期刊: 华西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 实验与研究
• 页码范围: 1767-1771
• 页数: 5页
• 分类号: R318.51|R329.2+7
• 语种: 中文

摘要

目的:应用心肌自发荧光(AF)研究心肌线粒体氧化代谢状态,监测线粒体功能改变的早期信号.方法:烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸[NAD(P)H]作为荧光探针,用光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)记录375nm紫外激光激发的心肌AF光谱和荧光寿命,测试影响线粒体呼吸时AF动态衰减.结果:在420～560nm光谱区域,至少需用3个荧光寿命池0.4～0.7ns,1.2～1.9ns和8.0～13.0ns描述细胞AF.线粒体呼吸阻断剂鱼藤酮可显著增加AF强度,缩短平均荧光寿命.氧化磷酸化解偶联剂二硝基酚可显著降低AF强度,在520nm处增宽荧光光谱,延长平均荧光寿命.这些结果和NADH荧光动力学离体实验(in vitro)有可比性.结论:光谱分辨的荧光寿命技术测定心肌NAD(P)H荧光有很好的重复性,在细胞水平上增加了心肌氧化代谢或线粒体功能障碍的知识,为临床诊断和治疗线粒体功能障碍开拓了新视野.