牛α干扰素在新城疫病毒La Sota疫苗株中的高效稳定表达及抗病毒活性检测

• 作者: 丁玉林 刘娣 曹有才 步志高 葛金英 解希帝
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 干扰素 牛 重组新城疫病毒 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65+9.5
• 字数: 3049字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7034.2009.05.003

摘要

研究在已有的新城疫病毒La Sota株反向遗传系统的基础上,利用新城疫病毒La Sota株作为表达载体,构建表达牛α干扰素(bovine interferon α)完整开放阅读框的全基因组质粒pFL-BoIFN α,转染BHK-21细胞获得表达牛α干扰素重组新城疫病毒.采用RT-PCR方法检测,证实收获的鸡胚尿囊液内的重组病毒含有相应外源基因.将重组病毒尿囊液经紫外线照射灭活新城疫病毒,利用表达绿色荧光蛋白的重组水泡性口炎病毒(VSV-EGFP)在牛肾细胞(MDBK)上测定rL-BoIFN α抗病毒活性,证实表达牛干扰素的重组新城疫病毒尿囊液能有效抑制VSV-EGFP在牛肾细胞上的复制,rL-BoIFNα接种SPF鸡胚所收尿囊液抗病毒活性高达2× 107 IU/mL.结果表明: 牛α干扰素在重组新城疫病毒rL-BoIFNα接种的SPF鸡胚尿囊液中获得良好表达,并具有高效而稳定的抗病毒活性.