卡巴胆碱对脂多糖刺激人血单核细胞释放炎症介质的影响及其机制研究

• 作者: 于燕 周国勇 杨红明 柴家科 盛志勇 胡森 邹日坤
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卡巴胆碱 脂多糖类 单核细胞 细胞因子类 受体,胆碱能
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: R364.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2009.01.009

摘要

目的 探讨卡巴胆碱对脂多糖(LPS)刺激后人外周血单核细胞释放炎症介质的影响及其受体机制.方法 取正常献血者外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,再利用单核细胞的贴壁性,分离获得单核细胞.用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液重悬,调整细胞浓度为2×105/ml后,加入包被了特异性捕获抗体(TNF-α、IL-6、IL,10)的96孔板,观察不同浓度卡巴胆碱(0.01～100 μmol/L)对LPS刺激下单核细胞产生 TNF-α、IL-6、IL-10的影响,并取最佳浓度进行受体机制探讨研究.实验分6组:空白对照(C)组仅加RPMI 1640培养液;LPS单独刺激(L)组仅加100ng/ml LPS刺激;烟碱预处理(N)组及卡巴胆碱预处理(K)组先用卡巴胆碱或烟碱(100μmol/L)预处理单核细胞5min,再加入100ng/ml LPS 刺激;阿托品+卡巴胆碱预处理(A+K)组和α-银环蛇毒素(α-Bgt)+卡巴胆碱预处理(α-Bgt+K)组先在单核细胞悬液中加入胆碱能M受体拮抗剂阿托品或胆碱能N受体α7亚基特异性拮抗剂α-Bgt,5min后给予卡巴胆碱,5min后再给予LPS刺激.孵育12h(TNF-α、IL-6)或24h(IL-10)后,洗去细胞,加入生物素标记的检测抗体,经链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶催化底物显色后,全自动免疫斑点图像分析仪检测TNF-α、IL-6、IL-10含量.结果 LPS单独刺激时,TNF-α、IL-6、IL-10含量较对照组明显升高(P<0.01).用卡巴胆碱或烟碱预处理细胞后,TNF-α、IL-6含量明显下降,与LPS单独刺激组比较差异显著(P<0.01),但IL-10含量则无明显变化.在0.01～100μmol/L浓度范围内,随着卡巴胆碱浓度增加,其对LPS刺激下单核细胞产生TNF-α、IL-6的抑制作用也更加明显.阿托品预处理细胞后,卡巴胆碱对LPS刺激下单核细胞释放TNA-α、IL-6的抑制作用无明显变化,而α-Bgt预处理细胞后,卡巴胆碱对TNF-α、IL-6释放的抑制作用明显减弱.结论 卡巴胆碱同烟碱一样具有强大的抗炎作用,该作用在单核细胞是通过N样胆碱能受体α7亚基实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盛志勇	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所	150	1338	19.0	26.0
2	柴家科	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所	206	1317	17.0	23.0
3	胡森	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所	147	1041	18.0	24.0
4	周国勇	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所	20	182	6.0	13.0
5	杨红明	解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所	48	264	10.0	13.0
6	于燕	海军总医院医学整形科	23	48	4.0	5.0
7	邹日坤	海军总医院医学整形科	3	10	2.0	3.0