东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长cDNA文库的构建

• 作者: 严厉 李和平 郝丽
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 东北梅花鹿 鹿茸 全长cDNA文库 SMART技术
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 120-122
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5382.2009.11.039

摘要

为克隆出与鹿茸生长发育相关基因的全长序列,采用SMART技术构建了东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库.用SV Total RNA Isolation System试剂盒提取总RNA,以逆转录酶PowerScriptTM 反转录合成第一链cDNA,然后通过LD-PCR合成并扩增ds cDNA.扩增产物经纯化、SfiⅠ酶切、过CHROMA SPIN-400柱去除小片段后,连接到SfiⅠ消化过的pDNR-LIB质粒载体中,最后用电转化法将重组质粒转化到E. coli DH5α内得到原始文库.经测定,构建的原始文库约含有2.56×10~6个重组子,插入片段多在0.5～2kb之间,平均插入片段长度约1.1kb,重组效率接近100%.结果表明,东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库已构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李和平		91	375	9.0	16.0
2	郝丽		13	50	4.0	6.0
3	严厉		2	11	2.0	2.0