HPLC法同时测定大鼠血浆中茶多酚主要活性成分EGCG和ECG

• 作者: 付婷 吕莉 李楠 梁骏 韩国柱
• 来源期刊: 药物分析杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高效液相色谱 茶多酚(TP) 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) 表儿茶素没食子酸酯(ECG)
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 39-43
• 页数: 5页
• 分类号: R917
• 语种: 中文

摘要

目的:建立HPLC法同时测定大鼠血浆中茶多酚(tea polyphenols,TP)主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)的浓度,为TP药代动力学研究提供测定方法学.方法:采用RP-HPLC法,使用Kromasil-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,预柱为Kromasil-C18保护柱(4.6 mm×20 mm,10 μm),以乙腈-0.1%枸橼酸溶液(14:86)为流动相,流速1.5 mL·min-1,检测波长280 nm;血浆样品200 μL加75 μg·mL-1间苯二酚内标溶液10 μL,乙酸乙酯400 μL提取2次,N2流挥干后加10%乙腈水溶液100 μL,漩混1 min,4℃低温离心(7500 r·min-1)10 min后,取上清液60 μL进样分析.结果:EGCG和ECG的保留时间分别为9.92 min和29.51 min,间苯二酚的保留时间为5.96 min,三者之间达到基线分离,并不受空白血浆和代谢物以及茶多酚中其他成分的干扰.EGCG和ECG标准曲线的线性范围分别为0.5～300 μg·mL-1(r=0.9999)和0.1～60 μg·mL-1(r=0.9999);日内精密度RSD均小于5.7%,日间精密度RSD均小于11.2%;准确度为94.78%～110.6%;EGCG、ECG和内标的萃取回收率分别为85.73%～91.93%,79.08%～86.51%,91.88%～94.88%;血浆样品在-20℃保存下至少在21 d内和窒温保存下8 h内稳定.大鼠iv TP 100 mg·kg-1后血浆样品应用上述方法测定血药浓度,表明TP药动学行为遵循二室模型一级动力学.结论:本文建立的大鼠血浆中TP主要活性成分EGCG和ECG的HPLC测定方法准确,专属性及重现性好,且快速简便,可用于TP注射液的非临床药代动力学研究.