siRNA靶向HDGF抑制大肠癌细胞SW480的生长

• 作者: ZHOU Huixin 余周军 刘展 刘鹏 周会新 张明亮 李毅妮 杨瑜明
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌衍生生长因子 RNAi 大肠癌
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1322-1326
• 页数: 5页
• 分类号: R735.34
• 字数: 3886字
• 语种: 中文

摘要

目的 肝癌衍生生长因子(HDGF)是近年来逐渐引起重视的一种细胞生长因子,在许多肿瘤细胞中高表达.本研究拟构建PNAi干扰慢病毒载体,沉默HDGF基因在大肠癌SW480细胞中的表达,观察细胞的增殖状态.方法 RT-PCR方法 检测HDGF基因在大肠癌中的表达.利用Invitrogen公司在线网站设计HDGF干扰序列,片段合成后构建慢病毒RNAi表达载体,随后利用293FT细胞将其包装成成熟慢病毒颗粒去感染SW480细胞,经Biasticidin抗性选择培养后,建立了稳定表达HDGF siRNA的SW480细胞株.实时荧光定量PCR和Western Blot检测HDGF基因在mRNA和蛋白水平表达变化;生长曲线和MTT法观察细胞增值情况的改变.结果 HDGF基因在大肠癌SW480细胞中表达较高.成功的构建了HDGF慢病毒KNAi表达载体,并建立了稳定表达靶向干扰HDGF基因表达的siRNA SW480细胞株.沉默HDGF基因在表达后,能明显体外抑制细胞的增殖.结论 针对HDGF基因的慢病毒RNAi载体能明显下调HDGF基因的表达,并在体外显著抑制大肠癌细胞增殖能力.