幽门螺杆菌UreB-Omp11融合蛋白的表达、纯化与免疫学活性检测

• 作者: 杨国俊 段广才 章涵 赵玉霞 郗园林
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 Ure B-Omp11 免疫学
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 125-129
• 页数: 5页
• 分类号: R183
• 字数: 3302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2009.01.039

摘要

目的:在大肠杆菌TB1(pMAL-c2X)中表达幽门螺杆菌(Hp)UreB-Omp11融合蛋白,并探索其免疫学活性,为Hp基因工程疫苗的研制奠定基础.方法:以重组质粒pET30a(+)-ureB-omp11为模板获得融合基因ureB-omp11片段,并插入到原核表达载体pMAL-c2X中进行融合蛋白的表达,用Amylose亲和层析法纯化融合蛋白,纯化的融合蛋白辅以免疫佐剂皮下免疫小鼠,蛋白印记法对免疫小鼠血清进行检测.结果:特异PCR法和酶切鉴定证实融合基因ureB-omp11克隆入表达载体pMAL-c2X中;重组菌TB1(pMAL-ureB-omp11)经诱导获得了高效表达的MBP-UreB-Omp11融合蛋白,该融合蛋白可以被Hp免疫小鼠血清的相应抗体所识别,纯化后的融合蛋白纯度达90%以上.通过大肠杆菌抗原吸收法纯化免疫小鼠血清后,与纯化的融合蛋白进行杂交,结果显示在134 000处出现特异杂交带,融合蛋白具有良好的免疫学活性.结论:成功构建了Hp MELHP27融合蛋白UreB-Omp11的重组疫苗候选株TB1(pMAL-ureB-omp11),为Hp蛋白质疫苗和核酸疫苗的研制奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章涵	信阳职业技术学院医学系	37	160	7.0	11.0
2	段广才		174	980	15.0	21.0
6	郗园林	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	119	673	13.0	20.0
7	赵玉霞	信阳职业技术学院医学系	39	135	6.0	9.0
8	杨国俊		7	36	3.0	5.0