新城疫活疫苗HB92克隆株的筛选、纯化与细胞培养特性观察

• 作者: 廖永洪 张蓉蓉 杨峻 温国元 王红琳 罗玲 罗青平 艾地云 邵华斌
• 来源期刊: 湖北农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 新域疫HB92克隆株 病毒纯化 细胞培养特性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 1436-1439
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+9.5|Q93-331|S852.4
• 字数: 3311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0439-8114.2009.06.048

摘要

将引进的新城疫V4无毒耐热毒株连续用鸡胚传代.每次挑选48～96 h有明显病变的死亡鸡胚,取其尿囊液毒于-20℃保存,观察V4毒株对鸡胚毒力的病理变化.结果显示,经过20代次的鸡胚毒力筛选.V4毒株对鸡胚的致死率从小于10%上升至20%以上,接种后120 h的活胚有明显地萎缩症状.将鸡胚20代次以上筛选的V4病毒液在鸡胚成纤维细胞上传代培养,并进行蚀斑筛选纯化病毒,直到第5代才出现明显地细胞病变.使用二层琼脂进行病毒的蚀斑分析,第二层琼脂糖在第一层凝固后72 h覆盖,8 h后NDV鸡胚成纤维细胞适应株的蚀斑出现.蚀斑大小直径在1～2 mm变化.通过对NDV V4鸡胚毒力筛选和蚀斑纯化.获得了一株蚀斑克隆株(NDV HB92).