钙黏蛋白11和核心结合因子α1双基因修饰人骨髓间充质干细胞

• 作者: 张劲 林立新 柳大烈 王晋煌 陈伯华 陈兵
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 钙黏蛋白11 核心结合因子α1 组织工程 人骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2009,（45）
• 所属期刊栏目: 干细胞转基因表达
• 页码范围: 8843-8848
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.45.008

摘要

背景:钙黏蛋白11对骨髓间充质干细胞进行基因修饰,可促进细胞的黏附性能.利用核心结合因子α1对骨髓间充质干细胞进行基因修饰,有望实现多能干细胞的成骨定向分化,并在诱导成骨分化的级联效应中发挥重要的信号作用.目的:拟采用腺病毒为载体,介导钙黏蛋白11、核心结合因子α1基因修饰骨髓间充质干细胞,观察两基因的表达情况.设计、时间及地点;细胞-基因学实验,于2008-08在珠江医院中心实验室完成.材料:人骨髓间充质干细胞来源于1例胸椎骨折男性患者,由珠江医院提供,患者对实验知情同意.钙黏蛋白11全长cDNA质粒由日本神户理研Riken分子生物中心Takeichi教授惠赠,全长核心结合因子α1基因质粒由美国Baylor医学院Ducy博士提供,pAdeasy腺病毒系统由美国约翰霍普金斯遗传所Bert博士馈赠.方法:Percoll密度梯度离心+贴壁法分离培养人骨髓间充质干细胞.利用PCR技术获得钙黏蛋白11和核心结合因子α1基因,分别构建到腺病毒穿梭载体上,然后分别通过同源重组获得重组腺病毒质粒,再将两病毒质粒包装获得重组病毒液,最后通过病毒将两基因导入骨髓间充质干细胞.主要观察指标:Western blot法检测钙黏蛋白11、核心结合因子α1基因在入骨髓间充质干细胞中的表达.结果:获得携带钙黏蛋白11和核心结合因子α1基因的病毒液,将其感染人骨髓间充质干细胞后,以Wastern blot检测两种基因同时获得高表达.结论:实验成功构建钙黏蛋白11和核心结合因子α1基因腺病毒载体,通过病毒转染入骨髓间充质干细胞,二者获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳大烈	南方医科大学附属珠江医院整形美容科	177	1288	16.0	25.0
2	王晋煌	南方医科大学附属珠江医院整形美容科	22	164	7.0	12.0
3	陈兵	南方医科大学附属珠江医院整形美容科	41	378	11.0	18.0
4	陈伯华	南方医科大学附属珠江医院整形美容科	11	104	4.0	10.0
5	林立新	烟台市毓璜顶医院整形美容科	2	0	0.0	0.0
6	张劲	南方医科大学附属珠江医院整形美容科	8	56	5.0	7.0