高山红景天叶肉原生质体分离培养与植株再生

• 作者: 刘剑锋 程云清 陈智文
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 高山红景天 原生质体 培养 再生
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1127-1131
• 页数: 5页
• 分类号: R282.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-2670.2009.07.041

摘要

目的 利用高山红景天组培苗叶片分离得到原生质体,经培养后获得再生植株.方法 研究了外植体前期预处理、外植体大小、酶液配比、酶液中甘露醇浓度等影响原生质分离的相关因素,确定最优分离条件.结果 用于原生质体分离的外植体无需黑暗预培养便可进行原生质体分离,外植体叶片长度大于1.5 cm为宜.获得原生质体的酶液组成为:1.0%纤维素酶Onzuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+10 mmol/L CaCl2·2H2O+0.1%MES+0.7 mmol/L KH2PO4+0.5 mol/L甘露醇,在25℃条件下酶解4 h,原生质体最高产量为39.43×106个/g鲜质量.原生质体活力为78.6%.原生质体培养基为1/2MS+1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/LZT+0.5 mol/L甘露醇+500 mg/L水解酪蛋白.浅层培养40 d时形成小愈伤组织.愈伤组织在MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA诱导产生不定芽,不定芽转入1/2MS基本培养基可获完整再生植株.结论 本研究为高山红景天多倍体育种提供了科学依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘剑锋		51	686	15.0	24.0
2	程云清		53	641	16.0	22.0
3	陈智文		64	651	15.0	22.0