Adipophilin真核表达载体的构建与表达分析

• 作者: 何玲 田荣波 袁中华 贾薇
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: adipophilin 基因重组 脂滴 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1487-1490
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 3179字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建能在真核细胞中表达的adipophilin表达质粒pcDNA3.1-HA-adi.方法 从培养的C57BL/6J小鼠血管平滑肌细胞提取总RNA,在PCR引物中加入HA序列,用RT-PCR及TOPO克隆技术得到HA-adi克隆栽体,测序后,把HA-adi定向插入pcDNATM3.1/myc-His(-)-C的多克隆住点.阳离子聚合物介导转染人THP-1巨噬细胞,用R.T-PCR及Western blot的方法检测目的 蛋白在细胞中的表达.结果 限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实成功获得HA-adi基因片段,HA-adi准确克隆入pcDNATM3.1/myc-His(-)-C的多克隆位点.转染THP-1巨噬细胞后,检测到目的 蛋白的表达.结论 成功构建pcDNA3.1-HA-adi,并在THP-1巨噬细胞中得到表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁中华	南华大学心血管病研究所	38	348	11.0	17.0