胰高血糖素样多肽 - 2的重组表达及鉴定

• 作者: 赵云 陈渝
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 胰高血糖素样多肽-2 原核表达 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 875-878
• 页数: 4页
• 分类号: R587.1
• 字数: 3477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2009.09.006

摘要

目的:构建胰高血糖素样多肽 - 2(GLP - 2)原核表达载体,在大肠杆菌BLR(DE3)中表达,为胰GLP - 2的作用机制的探究奠定基础.方法:人工合成GLP - 2序列,磷酸化后连接到质粒pET31b(+),构建成功的质粒GLP - 2/pET31b(+)转化至BLR(DE3)进行诱导表达,优化条件获得最大表达产量;纯化重组蛋白,溴化氰裂解蛋白获得单体蛋白,SDS - PAGE、Western blotting鉴定重组蛋白.结果:成功合成GLP - 2序列,与Genebank收录序列一致;构建原核表达质粒GLP - 2/pET31b(+),测序成功;37℃,OD600 nm为0.8时,加入1 mmol/L的IPTG诱导表达获取较纯的GLP - 2重组蛋白产量较高,溴化氰裂解获得了蛋白的单体.结论:成功构建GLP - 2原核表达载体,该蛋白具有生物活性.确定了优化表达条件,获得了具有生物活性的GLP - 2单体蛋白,为进一步研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵云	第三军医大学西南医院烧伤研究所	23	118	7.0	10.0
2	陈渝	第三军医大学西南医院烧伤研究所	83	232	8.0	11.0