三种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化

• 作者: 丁洁 于树娜 吴金生 朱建祥 王宝松 王晓萃 蒋吉英 魏德全
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 成纤维生长因子 肝细胞生长因子 表皮生长因子 肝细胞 诱导
• 年，卷（期）: 2009,（49）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 9753-9756
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4564字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.49.031

摘要

背景:间充质干细胞的生物学特性及影响分化调控因子的研究认为,体外原代培养的间充质干细胞自然分化为肝细胞的比例较低,选择一种合适的诱导剂提高其分化为肝细胞的比例尤为必要.目的:以肝细胞生长因子、表皮生长因子及成纤维生长因子体外联合,验证其诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的可行性.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-08在潍坊医学院实验中心完成.材料:Sprague-Dawley大鼠40只,由潍坊医学院实验动物中心提供.方法:采用贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,取传至第3代细胞,设立2组:空白对照组加入含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养基;联合诱导组在此基础上,另加入10 μg/L成纤维生长因子、8 pg/L.肝细胞生长因子、8 μg/L表皮生长因子.主要观察指标:倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化,免疫荧光染色观察甲胎蛋白及白蛋白的表达,PAS检测糖原的表达,靛青绿摄入情况,酶学检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的水平.结果:联合诱导组细胞呈多角形、卵圆形或圆形细胞的特征性改变,空白对照组骨髓间充质干细胞仍保持梭形或纺锤形.联合诱导组培养14 d可见白蛋白和甲胎蛋白免疫反应阳性细胞:诱导7 d时偶见PAS阳性细胞与靛青绿阳性细胞,随诱导时间延长,阳性细胞逐渐增多;诱导14 d时开始检测到谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的合成,21 d达高峰,之后下降.上述各指标空白对照组细胞均呈阴性.结论:成纤维生长因子、肝细胞生长因子与表皮生长因子体外联合应用,能够成功诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋吉英	潍坊医学院人体解剖学教研室	54	186	8.0	10.0
2	于树娜	潍坊医学院人体解剖学教研室	33	82	5.0	7.0
3	王晓萃	潍坊医学院人体解剖学教研室	33	100	6.0	8.0
4	朱建祥	昌邑市人民医院普外科	4	6	1.0	2.0
5	吴金生	潍坊医学院附属医院泌尿外科	22	48	3.0	6.0
6	魏德全	潍坊医学院人体解剖学教研室	10	32	3.0	5.0
7	丁洁	潍坊医学院人体解剖学教研室	12	37	4.0	5.0