一种椎间盘组织总RNA提取的改良方法

• 作者: 何海宁 史洵玮 孙红 赵献峰 辜俊 郑雪莲 钟应佳
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 椎间盘组织 Ⅱ型胶原酶 RNA提取
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 1687-1689
• 页数: 3页
• 分类号: Q5-3
• 字数: 2856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0501.2009.11.005

摘要

目的 改进传统常规法在椎间盘组织中总RNA提取,获得高质量的椎间盘组织总RNA.方法 健康成年Newsland白兔,完整取出椎间盘组织,随机分RNA传统方法组和酶消化改良组.传统组,按Trizol法提取总RNA;酶消化改良组,加入0.2%Ⅱ型胶原酶,置于细胞培养葙消化数小时,加入含小牛血清的PBS液终止,离心收集细胞.余步骤同传统组.结果 传统组,电泳结果未见28S和18S条带,5S条带部分可见;A260/280比值在1.5左右,蛋白多糖污染重.而酶消化组,电泳结果可见清晰的28S、18S和5S条带,且28S条带的亮度约是18S的两倍;3.260/280比值在1.8～2,0之间,无蛋白污染,此法提取的RNA,逆转录后可用于扩增β-actin基因.结论 酶消化改良法可望成为椎间盘组织总RNA提取的好方法.RNA片断完整,纯度高,无蛋白污染,不影响后续基因表达(RT-PCR)的分析,并且重复性好,可以推广.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑雪莲	四川大学华西第二医院分子与转化医学实验室	26	76	5.0	6.0
2	辜俊	四川大学华西第二医院分子与转化医学实验室	10	4	1.0	1.0
3	赵献峰	四川大学华西第二医院分子与转化医学实验室	8	31	3.0	5.0
4	史洵玮	四川大学华西第二医院分子与转化医学实验室	2	1	1.0	1.0
5	孙红	四川大学华西第二医院分子与转化医学实验室	3	30	1.0	3.0
6	何海宁	四川大学华西第二医院分子与转化医学实验室	4	22	2.0	4.0
7	钟应佳		1	1	1.0	1.0