脂质体介导的人甲状腺过氧化物酶基因转染肺癌A549细胞及其蛋白表达

• 作者: 严煜 张裕东 杜琎 王晓谭
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 甲状腺过氧化物酶 基因转染 肺癌细胞 脂质体 放射性碘治疗
• 年，卷（期）: 2009,（17）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3254-3257,封2
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文

摘要

目的:利用基因转染技术,研究以脂质体Lipofectamine2000为载体介导的人甲状腺过氧化物酶(TPO)基因体外转染肺癌细胞,检测感染细胞内TPO蛋白的表达,为放射性碘治疗肺癌提供理论和实验依据.方法:将获得的含TPO基因的质粒pcDAN3.1-hTPO进行扩增、纯化,并经酶切鉴定和DNA测序.将肺癌A549细胞在体外复苏与培养并分为两组:转染质粒peDAN3.1-hTPO的为实验组,转染空质粒pcDAN3.1的为对照组.以脂质体Lipofectamine2000为栽体,介导TPO基因转染肺癌细胞.采用Western Blot免疫印迹法和免疫组化法分别检测肺癌细胞中TPO蛋白的表达.结果:①酶切鉴定和DNA测序结果表明质粒pcDAN3.1-hTPO中插入的基因为hTPO基因,其片段大小和方向正确.②体外培养的肺癌细胞活力及数量正常,细胞活力为96%,细胞生长密度为1× 106/ml,满足实验要求.③质粒转染A549细胞后,Western Blot免疫印迹法显示:在实验组中,肺癌A549细胞有TPO蛋白的表达,而在对照组中无表达.④免疫组化染色结果显示:在实验组的肺癌A549细胞中,TPO蛋白表达阳性且主要分布于细胞膜上,阳性表达率可达75%,而在对照组中TPO蛋白表达阴性,两组比较差异有显著性(P=0.000).结论:①获得的hTPO基因片段的核苷酸序列与GeneBank报道完全一致.②在脂质体Lipofectamine2000的介导下,TPO基因能够有效地转染肺癌细胞.③转染人甲状腺过氧化物酶基因的肺癌细胞能够在体外成功地表达TPO蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严煜	南通大学附属医院心胸外科	25	130	8.0	10.0
2	王晓谭	南通大学附属医院心胸外科	12	58	4.0	7.0
3	张裕东	南通大学附属医院心胸外科	16	55	4.0	7.0
4	杜琎	江苏省中西医结合医院心胸外科	2	1	1.0	1.0