瘦素对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

• 作者: 刘伯轩 刘卓拉 刘师伟 张悦红 李华青 牛勃 赵宝珍
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 瘦素 成骨分化
• 年，卷（期）: 2009,（23）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 4534-4538
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.23.025

摘要

背景:瘦素及其受体在中枢和外周多个部位均有表达,具有多种生物学功能,对于骨代谢有着重要的影响作用,但目前瘦素影响骨重建的机制尚未完全明了.目的:探讨瘦素对入骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/2008-09在山西医科大学生化与分子生物学实验室完成.材料:健康志愿者髂骨骨髓由山西医科大学第二医院提供.瘦素为Sigma公司产品.方法:采用全骨髓法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,传至第3代以1×108L-1密度接种至预置盖玻片的6孔培养板中,设立3组:成骨诱导组添加原代培养液后,再加入含10-8 mol/L地塞米松、10 mmol/L β-磷酸甘油,50 mg/L维生素C的成骨诱导培养基:成骨+瘦素诱导组添加成骨诱导培养基后,再加入50 nmol/L瘦素;空白对照组仅加入含体积分数为10%胎牛血清的LG-DMEM培养液.主要观察指标:骨髓间充质干细胞表面标志表达、钙化结节染色结果、碱性磷酸酶活性,Ⅰ型胶原及骨钙素含量、骨保护素和RANKL蛋白的表达.结果:第3代骨髓间充质干细胞CD44和CD71阳性率分别为95.21%,72.31%,CD34阳性率仅为0.39%.成骨诱导21 d后von Kossa染色可见呈棕黑色的细胞外基质钙盐沉积.诱导14 d与空白对照组比较,成骨诱导组、成骨+瘦素诱导组骨髓间充质干细胞内碱性磷酸酶活性及Ⅰ型胶原、骨钙素含量均明显升高(P＜0.05);且成骨+瘦素诱导组各指标升高幅度明显高于成骨诱导组(P＜0.05).与成骨诱导组比较,成骨+瘦素诱导组骨髓间充质干细胞骨保护素蛋白的表达明显上调(P＜0.05),RANKL蛋白的表达明显下调(P＜0.05).结论:瘦素作用于人骨髓间充质干细胞后可促使其向成骨细胞分化,可能通过骨保护素/RANKL途径发挥对骨代谢的调节作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宝珍	山西医科大学第二医院内分泌科	67	308	8.0	15.0
2	刘卓拉	山西医科大学第二医院呼吸科	100	617	12.0	18.0
3	张悦红	山西医科大学生化与分子生物学教研室	104	446	11.0	15.0
4	刘师伟	山西医科大学第一医院内分泌科	16	89	6.0	8.0
5	牛勃	首都儿科研究所生物技术室	36	79	5.0	6.0
6	李华青		4	10	2.0	3.0
7	刘伯轩		3	9	2.0	3.0