MPCR检测食品中大肠杆菌O157和单核增生李斯特氏菌的研究

• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 多重PCR 大肠杆菌O157 单核增生李斯特氏菌
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 375-378
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 3793字
• 语种: 中文

摘要

根据大肠杆菌O157(Escherichia coil O157,E.coli O157)的志贺样毒素基因slt和"黏附抹平"因子eaeA基因、单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytohenes,LM)的编码溶血素O的hlyA基因和毒力基因plcA,分别设计上游和下游的slt、eaeA、hlyA和plcA四对引物,对应扩增片段依次为780、450、708、600bp.通过对单管多重PCR(multiplex PCR,MPCR)扩增的特异性、敏感性分析以及对单管多重PCR扩增条件,如Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度和退火温度等的优化,建立快速检测大肠杆菌O157和单增李斯特菌的多重PCR方法,该方法能同时检测到0.50mg的E.coliO157和单增李斯特菌基因组DNA,并且操作简便、快速,具有良好的敏感性和特异性,能够快速实现对食品中多种致病菌的诊断和监控.