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摘要:
目的 探讨氧化应激损伤血管内皮细胞定向趋化人骨髓间质干细胞(hMSC)的可能性.方法 体外分离和培养hMSC,分别加入不同条件培养基进行成脂肪细胞、成骨细胞和成血管内皮细胞诱导分化;以免疫组织化学染色和流式细胞仪检测hMSC抗原表达.利用人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞建立氧化应激损伤趋化hMSC的细胞模型:在Transwell培养板下腔接种5×105 ECV-304细胞并用3%H2O2(终浓度为0.01 ml/ml)处理1 h后,上腔内接种1×105 hMSC,为损伤细胞+hMSC组;同时设未损伤细胞+hMSC组(Transwell板下腔接种未经H2O2处理的ECV-304细胞,上腔内接种hMSC)和单纯hMSC组(Transwell板下腔不接种ECV-304细胞)作为对照.培养12 h后苏木精染色,倒置相差显微镜下计数各组细胞Transwell上腔迁移的hMSC数.另以酶联免疫吸附试验检测H2O2处理1 h的ECV-304细胞(H2O2处理组)和未予H2O2处理ECV-304细胞(对照组)培养上清液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)浓度.结果 hMSC经加入不同条件培养基诱导后可以分化为脂肪细胞、成骨细胞和血管内皮细胞.免疫组织化学染色和流式细胞仪检测显示hMSC CD29、CD44、CD90和CD106抗原呈阳性表达,CD31、CD34、CD45和CD49b抗原呈阴性表达.损伤细胞+hMSC组发生迁移的hMSC数为(8.00±0.22)个/高倍视野,明显高于未损伤细胞+hMSC组[(0.20±0.05)个/高倍视野,P<0.01]和单纯hMSC组[(0.00±0.00)个/高倍视野,P<0.01].H2O2处理组细胞培养上清液中MCP-1和VCAM-1浓度分别为(69.2±3.5)、(114.0±7.5)ng/ml,均明显高于对照组[(62.5±3.6)ng/ml,P<0.05;(97.2±5.0)ng/ml,P<0.01].结论 血管内皮细胞氧化应激损伤可趋化hMSC定向迁移到损伤血管,其机制可能与氧化应激损伤导致的趋化因子MCP-1和VCAM-1浓度升高有关.
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文献信息
篇名 血管内皮细胞氧化应激损伤对骨髓间质干细胞趋化作用的体外观察
来源期刊 中华医学杂志 学科 医学
关键词 间质干细胞 血管内皮细胞 氧化性应激 趋化作用
年,卷(期) 2009,(22) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 1577-1581
页数 5页 分类号 R3
字数 4268字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.22.021
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1 杨蓉娅 北京军区总医院全军皮肤病诊治中心美容整形中心 293 1410 15.0 25.0
2 赵志力 北京军区总医院全军皮肤病诊治中心美容整形中心 46 177 8.0 10.0
3 隋志甫 北京军区总医院全军皮肤病诊治中心美容整形中心 42 138 7.0 8.0
4 常冬青 北京军区总医院全军皮肤病诊治中心美容整形中心 42 132 7.0 9.0
5 王驰 北京军区总医院全军皮肤病诊治中心美容整形中心 4 8 2.0 2.0
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