建鲤葡萄糖激酶基因全长cDNA的克隆及组织表达

• 作者: 孙斯平 孟学平 彭永兴 施晓云 申欣 程汉良 董志国
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 建鲤 葡萄糖激酶基因 快速扩增cDNA末端 全长cDNA
• 年，卷（期）: 2009,（17）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 247-252
• 页数: 6页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 5779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2009.17.057

摘要

采用RT-PCR和RACE方法克隆建鲤(Cyprinus carpio Var.Jian)葡萄糖激酶(GK)基因全长cDNA序列,结果表明:建鲤GK基因cDNA全长2041bp,含1个1431bp的开放阅读框(ORF),编码476个氨基酸,GK蛋白分子量53.6kD,等电点5.13,建鲤GK氨基酸序列保守基序包括:1个己糖激酶标签序列Leu156-Phe181、2个N-连接糖基化位点Asn176和ASB241、1个细胞黏附序列Arg202-Asp204和1个糖胺聚糖黏附位点Ser455-Gly458,其氨基酸序列与翘嘴红鲌、人和鼠的GK氨基酸序列相似百分比分别为96.2%、79.8%和79.1%;以β-actin基因为内标,采用半定量RT-PCR方法对GK基因在肠系膜脂肪组织、肝脏、心脏、肌肉和大脑等组织的表达进行研究,结果表明GK基因仪在肝脏和大脑中表达,在肝脏中的表达水甲高于大脑.