体外培养组织工程用人骨髓间充质干细胞的试验性研究

• 作者: 丁义 王进 肖锋 陈鸿义
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 流式细胞术 微载体 组织工程
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1761-1766
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2|R318
• 字数: 5135字
• 语种: 中文

摘要

目的 本研究对人骨髓问充质干细胞(hBMMSCs)进行基本生物学特性研究,并探讨以微载体培养技术进行大量增殖的可能性.方法 对成人骨髓血用Percoll淋巴细胞分离液进行密度梯度离心,以获取hB-MMSCs.原代和传代培养后描绘细胞增长曲线.以流式细胞术对所获取的hBMMSCs进行细胞表型鉴定.以Cytodex3微载体对hBMMSCs进行动态培养,并与无微载体培养的细胞进行数量对比.结果 以Percoll淋巴细胞分离液可成功地对人骨髓血进行间充质干细胞的分离,原代和传代培养后细胞生长良好.以流式细胞术对hBMMSCs进行表型鉴定,其中CD29、CD44、CD73、CDl05和CD147呈阳性表达,阳性率高于96%;CD71、CD90的阳性率为86.74%和71.01%;而CD14、CD34、CD38、CD45和HLA-DR呈阴性表达,且大多低于2%.以Cytodex3微栽体进行动态培养时,hBMMSCs能够在微栽体上迅速贴附、铺展并生长.在相同的时间点,当hBMMSCs在微载体表面长满时,细胞数目均显著多于无微栽体的培养方法 (P＜0.001),其细胞密度和培养速度至少是普通培养法的4.5～9.6倍.Cytodex3上细胞数目的 大量增长大约在第8天后进入平台期.结论 应用PercoH淋巴细胞分离液能便捷地将hBMMSCs从人骨髓血中分离提取出来,对细胞活性影响小,并可以流式细胞术快速有效地鉴定其表面标记物.已获取的hBMMSCs的纯度较高,而且表型也较均一.与普通培养相比较,Cytodex3微载体培养体系可以在相同时间内获取大量的hBMMSCs,便于进一步开展在心血管外科领域的组织工程学应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖锋	北京大学第一医院心脏外科	47	285	9.0	15.0
2	王进	北京大学第一医院心脏外科	53	1284	18.0	35.0
3	丁义	北京大学第一医院泌尿外科研究所	15	83	6.0	8.0
4	陈鸿义	北京大学第一医院胸外科	38	330	11.0	16.0