应用双向启动子RNA干扰技术抑制大鼠血管平滑肌细胞MAPK的表达

• 作者: 傅春江 曾春雨 杨成明 王旭开 王燕 白云 章波 许雪青
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: MAPK RNA干扰 双向启动子
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 75-78
• 页数: 4页
• 分类号: R322.12|R394-33|R394.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.01.030

摘要

目的 应用双向启动子技术构建针对MAPK的干扰载体,观察其对MAPK表达的影响.方法 设计MAPK的干扰序列,构建基于双向启动子的干扰载体pHippy-MAPK,RT-PCR检测大鼠血管平滑肌细胞MAPK转录水平受抑制情况,免疫印迹检测大鼠血管平滑肌细胞MAPK蛋白表达受抑制情况,3H-TdR掺入法检测大鼠血管平滑肌细胞的增殖,免疫沉淀法检测大鼠血管平滑肌细胞MAPK活性.结果 构建了针对大鼠MAPK 3段序列的干扰载体pHippy-MAPK,并证实其中的1个干扰载体pHippy-MAPK3能有效抑制大鼠血管平滑肌细胞MAPK的表达.结论 基于双向启动子的编号为3的pHippy-MAPK干扰载体能有效抑制大鼠血管平滑肌细胞MAPK的表达,为干预MAPK信号途径通路提供了有效手段.