阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 张仁刚 朱晓燕 毕世樑 王雅静
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 医学
• 关键词: 阴道毛滴虫 粘附蛋白65-3基因 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 460-462
• 页数: 3页
• 分类号: R382.2+1|Q78
• 字数: 3425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0501.2009.04.007

摘要

目的 构建并鉴定阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因的真核表达裁体.方法 Trizol试剂提取阴道毛滴虫株基因组总RNA,RT-PCR扩增粘附蛋白65-3基因,定向克隆入pMD-18T线性质粒,重组子经双醇切、PCR鉴定及测序分析.鉴定正确的重组质粒pMD-18T-ap65-3和pcDNA3.1(+)空质粒径BamH Ⅰ和Xho Ⅰ限制性内切酶双酶切后,凝胶电泳纯化回收目的 片段.将粘附蛋白65-3基因亚克隆入pcDNA3.1(+)载体并进行筛选和鉴定.结果 成功克隆出阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因,序列分析发现该基因的开放阅读柜长为1704bp,与GenBank上公布的粘附蛋白65-3基因序列比较,同源性高迭99.6%.经PCR鉴定,限制性酶切鉴定及测序鉴定,正确构建出重组质拉pcDNA3.1-ap65-3.结论 成功克隆出粘附蛋白65-3基因并构建出真核表达质粒pcDNA3.1-ap65-3,为进一步研究该基因的功能及滴虫的致病机制奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁刚	川北医学院寄生虫学教研室	20	56	5.0	6.0
2	朱晓燕	川北医学院寄生虫学教研室	9	9	2.0	2.0
3	王雅静	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫教研室	30	62	4.0	4.0
4	毕世樑	四川大学华西第二医院妇产科	11	9	2.0	2.0