抗血小板膜糖蛋白Ibα胞内段多肽多克隆抗体的制备及初步应用

• 作者: 元艳宏 庄逢源 康佳蕊 戴克胜 王月丹 程虹 闫荣
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板 血小板糖蛋白GPIb-IX复合物 磷酸丝氨酸 抗体
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 826-830
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.12.010

摘要

目的 制备兔抗人血小板膜糖蛋白(GP)Ibα C端557～561氨基酸序列多肽的多克隆抗体,并初步用于人血小板GPIbα C端559位丝氨酸磷酸化状态的检测.方法 应用化学方法合成C-R-G-S-L-P(559位丝氨酸非磷酸化,Ser559)和C-R-G-s(p)-L-P(559位丝氨酸磷酸化,pSer559)多肽.将2种多肽分别与钥孔蜮血蓝蛋白交联后,以皮下注射法分别免疫新西兰大白兔,分离获得2种抗血清(抗Ser559多抗和抗pSer559多抗).应用斑点印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 对抗血清进行鉴定并检测效价.从人血小板裂解液中分离纯化血小板GPIbα,利用抗Ser559多抗和抗pSer559多抗、采用ELISA方法检测人血小板GPIbαC端559位丝氨酸磷酸化状况.结果 所制备的2种多抗分别特异性识别各自抗原,效价分别为1:32 000和1:64 000.2种多抗均可与纯化的人血小板GPIbα特异结合,表明人血小板GPIbα 559位点丝氨酸存在磷酸化与非磷酸化两种状态.结论 应用人工合成多肽成功制备出2种可特异性识别丝氨酸磷酸化状态的兔抗人血小板GPIbα胞内段多肽多抗,并证明人血小板GPIbαC端559位丝氨酸存在磷酸化状态.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庄逢源	北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室	24	97	5.0	9.0
2	王月丹	北京大学医学部免疫系	76	192	7.0	12.0
3	康佳蕊	北京大学医学部免疫系	2	2	1.0	1.0
4	闫荣	北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室	4	1	1.0	1.0
5	程虹	北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室	2	2	1.0	1.0