农杆菌介导法将硝酸还原酶基因转入大白菜的研究

• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大白菜 农杆菌 硝酸还原酶基因(NR) 硝酸盐含量
• 年，卷（期）: 2009,（30）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 14597-14599
• 页数: 3页
• 分类号: S634.1
• 字数: 3152字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立大白菜的硝酸还原酶基因(NR)转化体系.[方法]以大白菜北京小杂60为材料,通过农杆菌LBA4404介导,将硝酸还原酶基因(NR)转入大白菜,对获得的转NR基因苗进行PCR检测、Southern杂交检测以及硝酸盐含量测定.[结果]试验初步建立了一套大白菜的转化体系,即以预培养2 d苗龄4 d的大白菜不带柄半子叶为外植体,在OD_(600 nm)值约为0.6的农杆菌工程菌液中浸染8min,然后在pH值为5.8且不加抗生素的分化培养基中将子叶与菌共培养2 d,其后经过诱导、抗生素筛选、生根生长等过程,获得抗性植株,转化频率为6.48%.对抗性植株采用分级筛选,获得8株转NR基因苗.[结论]试验证实,NR基因已整合进大白菜的基因组中并得到表达,植株体内的硝酸盐含量均低于对照.