TIEG特异的siRNA慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 叶礼红 孙辽 孟晓军 舒晓春 邬伟民 鲁红云
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 慢病毒载体 TIEG
• 年，卷（期）: 2009,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2568-2572
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 3691字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建TIEG基因siRNA慢病毒载体.方法 针对已经筛选确定的TIEG基因siRNA有效靶序列.合成靶序列的Oligo DNA退火形成双链DNA与经BamH Ⅰ和EcoRl酶切后的PshRNA-copGFP-lendvector慢病毒载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生psiRNA-TIEG慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆.测序鉴定,用psiRNA-TIEG和病毒包装系统共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度;用包装病毒颗粒注射大鼠,通过RealTime-PCK检测大鼠肾组织TIEG mRNA的表达水平.结果 PCR和测序证实,成功构建TIEG siRNA慢病毒栽体psiRNA-TIEG,包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为1×10<'5>ifu/μL;实验组大鼠TIEGmRNA的表达水平明显低于对照组(50.7%).结论 成功构建大鼠TIEG基因siRNA慢病毒栽体psiRNA-TIEG.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	舒晓春	中山大学附属第五医院内分泌科	83	657	14.0	21.0
2	叶礼红	中山大学附属第五医院内分泌科	39	175	8.0	10.0
3	孙辽	中山大学附属第五医院内分泌科	53	267	9.0	13.0
4	孟晓军	中山大学附属第五医院内分泌科	32	148	5.0	11.0
5	鲁红云	中山大学附属第五医院内分泌科	42	187	7.0	10.0
6	邬伟民	中山大学附属第五医院内分泌科	3	5	1.0	2.0