重组人内皮抑素提取方法的优化及其对膀胱癌的抑制作用

• 作者: 付宜鸣 任明华 倪少滨 刘兴汉 徐万海 焦治兴 王长林 赵忠山 陈起引 麻立
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮抑素类 膀胱肿瘤 蛋白表达 抗肿瘤
• 年，卷（期）: 2009,（46）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3285-3288
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3581字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.46.012

摘要

目的 摸索重组人内皮抑素(rhES)蛋白的最佳表达条件.探索内皮抑素(Es)对膀胱癌实体肿瘤及细胞系的抑制作用.方法 分别从不同异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、加IPTG 时机、表达时间等几个方面对 rhES 的蛋白表达条件进行摸索和优化.活性检测:(1)动物实验:观察内皮抑素对裸鼠皮下移植瘤的生长情况的影响.(2)细胞实验:MTT法、肿瘤细胞生长曲线观察内皮抑素对T-24膀胱癌细胞系的作用.结果 rhES 在大肠杆菌中的表达量占总菌体蛋白的58.65%,纯化后的蛋白纯度为96.22%.动物实验:rhES的抑瘤率为66.8%.细胞实验:MTT实验中rhES的半数抑制浓度IC_(50)=22μg/ml;肿瘤细胞生长曲线表明第7天时rhES组的细胞数比对照组减少了58.75%.结论 本实验所优化的最佳表达条件可获得高表达、高活性的rh Es蛋白,Es不但对裸鼠接种的膀胱癌有抑制作用,对膀胱癌细胞系也有抑制作用.