采用农杆菌介导转化法的泡盛曲霉表达载体的构建

• 作者: 张义正 王熙 贺新生 陈波
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 泡盛曲霉 glaA表达盒 农杆菌介导转化法 表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 181-185
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 5162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2009.01.043

摘要

为在泡盛曲霉中表达外源基因、克服泡盛曲霉常规转化法效率低下的瓶颈,本研究拟构建采用农杆菌介导转化法的泡盛曲霉表达载体.通过PCR,从糖化酶基因(glaA)高效表达的泡盛曲霉菌株SG1基因组DNA扩增获得glaA 2.1 kb启动子片段(包含信号肽编码序列)及1.1kb终止子片段,构建了外源基因表达盒.以根瘤农杆菌双元载体pCAMBIA1302为基础,删除非必需区段及多余限制酶位点,插入上述外源基因表达盒及来自丝状真菌标记载体pAN7-1的潮霉素抗性标记,构建采用农杆菌介导转化法的泡盛曲霉分泌整合型表达载体pSUAA52am.转化结果表明:采用原生质体法的转化效率为21个转化子/106分生孢子,而农杆菌介导法可达1106个转化子/106分生孢子,是原生质体法的53倍.构建载体成功利用glaA表达盒与农杆菌介导转化法的高效特性,可为利用泡盛曲霉高效表达外源基因奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张义正	四川大学生命科学学院	150	2059	26.0	38.0
2	陈波	四川大学生命科学学院	105	415	11.0	16.0
4	贺新生	西南科技大学生命科学与工程学院	127	741	12.0	21.0
7	王熙	西南科技大学生命科学与工程学院	15	195	7.0	13.0