3种RNA提取方法在血清丙型肝炎病毒RNA定量检测中的性能评价

• 作者: 丁柳 代波 刘显中 宋兴勃 庄杰 应斌武 张磊 林立 王军 陆小军
• 来源期刊: 中华医院感染学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA提取 HCVRNA定量 提取效率 RNA质量 CT值
• 年，卷（期）: 2009,（22）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 3027-3029
• 页数: 3页
• 分类号: R446
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-4529.2009.22.009

摘要

目的 比较3种方法对血清HCV RNA的提取性能,并对其作方法学评价,揭示RNA提取技术对HCVRNA定量的影响.方法 使用QIAamp Viral RNA Mini Kit(Q法),NucliSens miniMag系统(M法)和匹基(PG)丙型肝炎病毒定量试剂盒自带RNA提取方法(P法)进行血清HCV RNA提取,实时荧光RT PCR定量检测,对77例临床血清标本进行了提取检测,同时设计了方法学评价实验,从准确度,重复性,线性和灵敏度方面评价3种方法.结果 77例临床标本的M、Q和P法阳性率分别是85.7%、84.4%和36.3%;25例共同阳性标本中,M和Q法的CT值分别比P法平均低7.5和9.35,表现出高于P法的提取效率和RNA质量;M和Q法的标准变异指数(S.D.I.)绝对值均<2,P法S.D.I.绝对值>2;M法平均CV为40.0%,Q法为71.0%,P法>100.0%;M法表现最佳的线性(R>0.99),M、Q和P法的最低检测限分别为39.4、394和3943 IU/ml.结论 从提取效率和收获RNA质量上M和Q法远远优于P法,进一步方法性能表明,M法为HCV RNA定量最佳提取方法,而P法因其提取效率低、收获RNA质量差以及重复性不好,不适合临床HCV RNA定量试验.