纳米重组tPA基因质粒构建及对狗机械瓣膜置换术后血栓形成的预防

• 作者: 令文萍 何霞 叶小青 姬尚义 季军 张艳辉 杨晓涵 王小雷 郭建洲
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米微粒 tPA 机械瓣膜置换术 血栓形成
• 年，卷（期）: 2009,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2919-2923
• 页数: 5页
• 分类号: R-332|R619.2
• 字数: 4035字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨应用纳米重组tPA基因质粒预防狗实验性机械瓣膜置换术后血栓形成.方法 建立狗心脏三尖瓣机械瓣膜置换术模型;构建重组tPA基因质粒,用壳聚糖为材料制备纳米微粒包裹基因质粒并制备成转基因药物,在心脏三尖瓣机械瓣膜置换术同时注射心肌以转染心肌组织,观察动物存活时间及其抗凝效果;用免疫组织化学技术观察心肌细胞tPA蛋白表达;检测凝血酶原时间、INR和纤溶降解产物D-二聚体含量;动物死亡和观察期结束后取心脏观察血栓形成状况. 结果 成功建立狗心脏三尖瓣机械瓣膜置换术模型;成功构建了纳米重组tPA基因质粒并成功转染心肌细胞;实验组动物健康存活均达到观察期12周,而对照组动物平均存活(40.33±9.67)d,实验组与对照组相比存活时间显著延长(P<0.01);静脉血D-二聚体含量检测显示,实验组于术后1周增高并且持续增高至12周,显著高于对照组(P<0.01);实验组和对照组观察各期凝血酶原时间和国际标准化比值(INR)无显著变化(P>0.05);心脏解剖显示实验组动物瓣膜周围及心腔内未见血栓形成,而对照组动物可见血栓形成.结论 构建的纳米重组tPA基因质粒可预防实验性机械瓣膜置换术血栓形成,这为应用基因药物防治人类疾病提供实验基础.