RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响

• 作者: 刘弘晟 周莹 李文林 熊丽霞 石小玉 赵林
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: DLL4 人微血管内皮细胞 RNA干扰 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2009,（24）
• 所属期刊栏目: 软组织构建相关基础实验
• 页码范围: 4700-4703
• 页数: 4页
• 分类号: R349.33
• 字数: 4133字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.24.020

摘要

背景:Delta-like 4(DLL4)是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成.目的:研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响.设计、时间及地点:随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成.材料:人微血管内皮细胞由上海细胞生物和生物化学研究所提供.方法:设计和化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lepofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染人微血管内皮细胞.提取细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应扩增,琼脂糖电泳检测DLL4 mRNA.提取细胞总蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳.采用四甲基偶氮唑盐法检测DLL4 siRNA对人微血管内皮细胞增殖的影响,实验分4组:①85 nmol/LDLL4 siRNA-duplex组.②85 nmol/L DLL4 siRNA-scrambled阴性对照组.③lepofectamine组.④未经处理组.主要观察指标:RNA干扰后,人微血管内皮细胞DLL4的转录和蛋白表达及人微血管内皮细胞的增殖.结果:反转录-聚合酶链反应和Western blot实验结果显示,人微血管内皮细胞转录DLL4和表达DLL4蛋白;85 nmol/LDLL4siRNA完全抑制人微血管内皮细胞DLL4转录和DLL4蛋白的表达.DLL4 siRNA抑制人微血管内皮细胞DLL4表达的有效浓度为85 nmol/L.四甲基偶氮唑盐实验结果显示,85 nmol/L DLL4 siRNA-duplex组的细胞增殖率为190.00%,未经处理组的细胞增殖率为110.00%.结论:人微血管内皮细胞表达DLL4,DLL4 siRNA抑制人微血管内皮细胞表达DLL4并促进人微血管内皮细胞增殖.DLL4对人微血管内皮细胞增殖具有抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊丽霞	南昌大学医学院病理生理学教研室	25	49	4.0	5.0
2	石小玉	南昌大学医学院组织学与胚胎学教研室	30	50	5.0	6.0
3	周莹	南昌大学医学院组织学与胚胎学教研室	20	63	4.0	7.0
4	李文林	南昌大学医学院病理生理学教研室	24	58	4.0	6.0
8	刘弘晟	南昌大学医学院江西省医学科学研究所医学生物高技术重点实验室	2	4	2.0	2.0
9	赵林		1	2	1.0	1.0